Os Killies habitam áreas de ambientes temporários, que podem secar totalmente (killies anuais) ou ambientes perenes (killies não anuais). Estes ambientes podem ocorrer em diferentes tipos de ecossistemas, tais como: restinga, florestas, savanas, manguezais, etc. Os killies podem ser encontrados em todos os continentes, exceto o Australiano. Estando mais presentes nos continentes Sulamericano e Africano

Os principais ambientes onde encontramos os killies são:
* Poças de floresta - Leptolebias, Pterolebias, Rachovias.
* Poças de restinga - Simpsonichthys, Nematolebias, Leptolebias.
* Poças de Pantanal e cerrado - Cynolebias, Simpsonichthys, Plesiolebias, Maratecoara, Stenolebias, Spectrolebias, Pituna, Trigonectes, Neofundulus.
* Poças de savana - Nothobranchius.
* Poças de baixada - Leptolebias.
* Charcos - Cynopoecilus, Austrolebias, Megalebias, Austrofundulus.
* Riachos de floresta e baixada - Rivulus, Aphyosemion, Epiplatys.
No Brasil os Killifishes são encontrados em todas as regiões:

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